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肌鈣蛋白I心臟 - 人類
發(fā)布時間： 2025-06-18 點擊次數(shù)： 486次肌鈣蛋白I心臟 - 人類
貓編號 8T53
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貓編號。
8T53
來源：
人類心肌組織。
從器官捐贈者采集的血液樣本檢測結果顯示，其為乙肝表面抗原、HIV-1和HIV-2抗體、丙肝病毒和梅毒螺旋體陰性。
應用程序：
TnI是肌鈣蛋白的抑制亞基，肌鈣蛋白是細肌絲調節(jié)復合物，賦予骨骼肌肌動蛋白-肌球蛋白ATP酶活性對鈣的敏感性。
TnI 存在三種同工酶，一種對應于慢肌骨骼肌，一種對應于快肌骨骼肌，一種對應于心肌。兩種骨骼肌 (skTnI) 和一種心肌 TnI 形式的氨基酸序列有 40% 的差異。此外，人類心肌 TnI 在其 N 末端區(qū)域有骨骼肌形式所沒有的額外氨基酸殘基，這使得這種蛋白質成為指示心臟特異性的有前途的分析物。在心肌梗死 (MI) 發(fā)生后的前 15 小時內，心肌 TnI 的釋放模式與 CK-MB 相似，但在血清中保持升高長達 6 天。這種觀察和心肌 TnI 的獨氨基酸序列使其成為 MI 的重要診斷標志物。
TnI 適用于免疫檢測中的標準，用于早期檢測心肌梗死、生產抗血清的免疫原和標記物用于碘化。
分析：
純度 > 98 % (SDS-PAGE)。
免疫印跡法用特異性單克隆抗體與肌鈣蛋白I心臟亞型反應，確認免疫活性。
TnI 濃度通過分光光度法測定，使用 A (0.1 %, 280 nm, 1 cm) 等于 0.42。該系數(shù)是根據人類 cTnI 的氨基酸組成 (FEBS Lett, 270, 57-61) 計算得出的。
展示：
從0.01 M鹽酸凍干。
建議用Tris/尿素緩沖液（20 mM Tris，pH 7.5，7 M尿素，5 mM EDTA，15 mM 2-基乙醇）將此產品重新溶解至接近1 mg/ml的濃度。
在中性pH值和生理鹽濃度下溶解度有限。
存儲：
凍干 -20°C（允許 -15 … -30 °C）
再溶解 -70°C（允許 -65 … -80 °C）其他信息：
避免反復凍融。建議在重組成分后分裝。
材料安全注意事項：
此產品僅售用于研究或進一步制造。處理此材料時應遵循標準實驗室操作程序。
技術說明
血液凝固與貧血•骨代謝•心臟標志物•生育與妊娠•激素標志物•免疫學與血清學•傳染病•炎癥•腎臟疾病•代謝綜合征•神經科學•甲狀腺疾病•腫瘤標志物•獸醫(yī)學
嵌合型心肌肌鈣蛋白I抗體
與嗜異性抗體相關的問題已被認知數(shù)十年。盡管對嗜異性抗體在普通人群中流行率的估計差異較大，但普遍認為至少達到10%（1）。
當人體接觸不同動物或動物源制品時，就會產生嗜異性抗體。這些抗體通常為人類抗小鼠（HAMA）、抗兔、抗山羊、抗綿羊、抗牛、抗豬、抗大鼠或抗馬抗體。在免疫診斷領域，該問題最常與HAMA相關，因為大多數(shù)診斷檢測都使用小鼠源抗體。
HAMA可能導致假陽性或假陰性結果
在診斷檢測中，HAMA可能導致假陽性結果，有時也會導致假陰性結果（2-3）。假陽性結果是由HAMA對檢測抗體的交聯(lián)作用引起的，而當HAMA與檢測抗體結合并由此阻斷抗原結合時，就會產生假陰性結果（見圖1）。
![圖1. 人類抗小鼠抗體（HAMA）可在免疫測定中引起假陽性和假陰性結果。
假陽性結果可能會延誤正確診斷，若該檢測用于急性心肌梗死（AMI）等危及生命疾病的診斷，甚至會導致不必要的住院治療（4）。一項針對因疑似心肌梗死（MI）而接受心肌肌鈣蛋白I檢測的受試者研究發(fā)現(xiàn)，HAMA在cTnI升高的受試者中導致5.5%的假陽性，在cTnI升高但肌酸激酶正常的受試者中導致14%的假陽性（5）。
為解決HAMA帶來的問題，大多數(shù)檢測方法制造商在檢測開發(fā)過程中會采取額外措施。常用的程序是使用阻斷試劑抑制非特異性結合，這些試劑從普通小鼠IgG到更精細的配方不等。盡管在大多數(shù)情況下這些措施是足夠的，但確實會在材料和人工方面增加額外成本。使用Fab片段也可以抑制HAMA的影響，但這同樣增加了一個生產步驟，并增加了每次檢測的成本。
臨床應用
急性心肌梗死的早期標志物
嵌合抗體有助于避免HAMA效應
在診斷檢測中解決HAMA問題的一個有力工具是使用嵌合抗體或全人源化抗體。由于對臨界值要求低，且即使在AMI患者的血漿中cTnI水平也非常低，肌鈣蛋白檢測特別容易受到HAMA的影響。我們現(xiàn)在已通過將抗體恒定區(qū)從小鼠來源序列改為人類來源序列，將我們的兩種抗心肌肌鈣蛋白I（TnI）抗體轉化為嵌合蛋白。嵌合cTnI抗體Rec19C7和Rec16A11由負責抗原特異性的原始小鼠來源可變區(qū)和IgG1同種型的人類來源恒定區(qū)組成（見圖2）。
![圖2. Hytest嵌合cTnI抗體的示意圖
同種型轉換對抗體性能無影響
天然19G7抗體的亞類為IgG2b，而嵌合RecChim19C7的亞類為IgG1。為了確定同種型轉換是否有任何影響，我們在幾種抗體組合中比較了天然和嵌合19C7的性能（見圖3）。結果證明兩種19C7形式的性能非常相似，觀察到的差異在15%以內，這與批間變異系數(shù)一致。
![圖3. 同種型轉換對抗體19C7的性能沒有影響。
A）檢測步驟的示意圖。使用天然（左）或嵌合（右）19C7作為捕獲抗體，用Eu3?標記的天然抗cTnI（560、MF4、625或560）作為檢測抗體，肌鈣蛋白復合物作為抗原。
B）如圖所示，在四種不同的夾心免疫測定中，將嵌合RecChim19C7（亞類IgG1）的性能與天然19C7（亞類IgG2b）進行了比較。
嵌合抗體可防止體外診斷檢測中的HAMA效應
為驗證嵌合抗體對HAMA效應不敏感，使用從AMI患者獲得的含HAMA的血清樣本測試了嵌合抗體和天然抗體的不同組合的性能。血清樣本中的HAMA濃度范圍為807 ng/ml至6220 ng/ml（見圖4）。含HAMA最高的血清在所有基于天然抗體的組合中都產生了非常高的背景信號。同時，含HAMA較低的血清樣本產生了較低但顯著的背景信號。與此同時，所有使用嵌合抗體的檢測在所有測試的HAMA樣本中要么沒有背景信號，要么只有可忽略的背景信號。
![圖4. 嵌合抗體可減輕HAMA效應。
使用三種不同HAMA濃度的血清樣本測試了嵌合和天然19C7及16A11在HAMA存在下的性能：樣本1中為807 ng/ml，樣本2中為1388 ng/ml，樣本3中為6220 ng/ml。使用不含血清的緩沖液作為對照。測試了以下免疫測定組合：4C2-19C7和4C2-RecChim19C7（A），4C2-16A11和4C2-RecChim16A11（B），以及19C7-16A11和19C7-RecChim16A11（C）。
該測試結果清楚地表明，使用嵌合抗體可以防止HAMA效應，這使其成為解決這一常見問題的潛在新工具。
訂購信息
單克隆抗體
|產品名稱|目錄號|單克隆抗體|亞類|備注|
|重組嵌合抗cTnI|RC4T21|RecChim19C7|IgG1|酶免疫測定|
|RecChim16A11|IgG1|酶免疫測定|
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