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moltox-華新
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介紹
沙門(mén)氏菌致突變性檢測(cè)試劑盒中包含的材料幾乎包括所有如Maron所述，進(jìn)行“艾姆斯分析"所需的供應(yīng)
&Ames（Maron，D.M.和B.N.Ames，沙門(mén)氏菌改良方法）突變?cè)囼?yàn)，突變研究，113:173-2151983）和Mortelmans&Zeiger（Mortelmans，K.和E.Zeiger，艾姆斯沙門(mén)氏菌/微粒體致突變性分析，突變研究，455:29-602000）。本手冊(cè)簡(jiǎn)要概述了測(cè)試的重要方面-我們強(qiáng)烈建議您仔細(xì)閱讀其中一個(gè)在您嘗試執(zhí)行以下操作之前，請(qǐng)參閱這些文件和OECD指南471化驗(yàn)MOLTOX®的所有元件該套件采用最高標(biāo)準(zhǔn)配方和制造質(zhì)量和部件符合Maron&Ames的建議（同上）。提供的某些材料（如STD）™ 冷凍干燥（S9）已經(jīng)過(guò)測(cè)試由我們的實(shí)驗(yàn)室專門(mén)開(kāi)發(fā)用于包含在分析試劑盒中。大部分工具包中包含的材料附有GLP級(jí)質(zhì)量控制和配方說(shuō)明-您可以放心，每個(gè)藥盒的每個(gè)元素都已在分析中*測(cè)試性能。
MOLTOX®
沙門(mén)氏菌致突變性檢測(cè)試劑盒供個(gè)人使用 精通微生物學(xué)的科學(xué)和藝術(shù)；使用嚴(yán)格的無(wú)菌技術(shù)是必要的
對(duì)于成功應(yīng)用工具包中包含的材料至關(guān)重要。而試劑盒中包括的細(xì)菌菌株（鼠傷寒沙門(mén)菌菌株TA1535、TA1537、TA98和TA100）是減毒的，它們具有潛在的致病性，必須加以處理 照著如果你對(duì)菌株的安全處理有任何疑問(wèn)在您咨詢我們之前，請(qǐng)不要繼續(xù)使用本工具包中包含的內(nèi)容或已獲得熟練生物化學(xué)家的建議；或微生物學(xué)家。
“Ames分析"的性能包括幾個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)步驟；例如。，試驗(yàn)設(shè)計(jì)；S9混合配方；加藥和電鍍；表型確認(rèn)；目標(biāo)細(xì)胞效價(jià)測(cè)定；閱讀（計(jì)數(shù)）和分析。中包含的材料選擇工具包是為了在以下方面為用戶提供相當(dāng)大的靈活性：測(cè)試設(shè)計(jì)。本手冊(cè)旨在幫助使用工具包內(nèi)容；本手冊(cè)中提供的信息旨在補(bǔ)充馬龍和艾姆斯，摩特勒曼和澤格爾的報(bào)紙。本手冊(cè)中包含的說(shuō)明雖然以逐步的方式呈現(xiàn)，但可以修改-如果您希望在分析的任何階段獲得幫助，請(qǐng)聯(lián)系我們的客戶服務(wù)，我們將很高興與您合作，幫助解決任何可能出現(xiàn)的問(wèn)題。
化驗(yàn)
MOLTOX®
試劑盒包含四種測(cè)試菌株：TA1535、TA1537、TA98和TA100在組氨酸操縱子中構(gòu)建具有不同損傷的菌株（見(jiàn)表1，莫特爾曼和澤格爾）。這種突變使它們不能合成組氨酸，即。它們是需要外源性組氨酸的組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型。另外，TA1535，TA1537，TA98和TA100改變了細(xì)胞壁（rfa），增加了細(xì)胞對(duì)某些物質(zhì)的滲透性高分子量材料。這些菌株在DNA修復(fù)編碼中也有一個(gè)損傷導(dǎo)致對(duì)各種誘變劑敏感性增加的基因（uvrB）。從此病變延伸至生物素合成基因（bio），生物素也是生長(zhǎng)所必需的]。測(cè)試菌株TA98和TA100攜帶一個(gè)質(zhì)粒（pKM101），其作用是增加易出錯(cuò)的DNA修復(fù)系統(tǒng)的活性和對(duì)抗生素的耐藥性 氨芐西林、測(cè)試菌株TA1535和TA1537不含質(zhì)粒。由于測(cè)試菌株的特性，“Ames分析法"特別適用于誘變活性檢測(cè)。幾種測(cè)試菌株對(duì)DNA成像化學(xué)誘變劑的反應(yīng)不同，因此通常組合使用。每個(gè)由于特定的環(huán)境因素，該菌株傾向于對(duì)特定類別的致突變化學(xué)物質(zhì)產(chǎn)生反應(yīng) 組氨酸操縱子損傷。然而，暴露于誘變劑可能導(dǎo)致遺傳變異組氨酸操縱子的逆轉(zhuǎn)導(dǎo)致野生型表型的恢復(fù)；突變體的組氨酸操縱子功能“恢復(fù)"，并能合成組氨酸。分析取決于區(qū)分組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型（測(cè)試員）的能力菌株）和組氨酸原營(yíng)養(yǎng)體（突變體）。相應(yīng)地，目標(biāo)細(xì)胞被鍍?cè)诒砻嫔虾形⒘拷M氨酸的培養(yǎng)基，可進(jìn)行幾輪細(xì)胞分裂必須“修復(fù)"突變事件；組氨酸迅速耗盡，導(dǎo)致細(xì)胞停止生長(zhǎng)非突變細(xì)胞的生長(zhǎng)。如果存在致突變化學(xué)物質(zhì)，（相對(duì)）罕見(jiàn)改變的組氨酸操縱子可能發(fā)生逆轉(zhuǎn)，導(dǎo)致生長(zhǎng)的繼續(xù)微量組氨酸耗盡后。出現(xiàn)在組氨酸限制酶上的回復(fù)突變菌落培養(yǎng)皿代表原生動(dòng)物，它們要么是自發(fā)產(chǎn)生的，要么是由于細(xì)菌的作用誘變劑。
以下章節(jié)描述了進(jìn)行基本四種應(yīng)變的程序
化驗(yàn)大多數(shù)情況下，所述方法直接取自Maron&Ames（同上）以及后來(lái)的Mortelmans&Zeiger。如果您之前沒(méi)有使用分析，我們建議您嚴(yán)格遵守這些說(shuō)明；有經(jīng)驗(yàn)的方法將查找有關(guān)STDiscs使用的有用信息™, 四元計(jì)算機(jī)™ 盤(pán)子，和凍干S9。
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