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Camtag-AT0009
產品時間：2022-11-01
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Camtag-AT0009 Camtag-AT0009
抗 β-肌動蛋白兔單克隆抗體加載控制目錄編號: AT0009Actin 是高度保守的蛋白質，參與各種類型的細胞運動，并在所有真核細胞中普遍表達。該抗體在 Jurkat、 A431、 HEK293、 HepG2、 MCF-7、 NIH3T3和 PC12全細胞裂解物中均呈陽性信號。這種抗體在下列 FFPE 組織中的 iHC 呈陽性反應: 人類正常皮膚和 IF 中的 HeLa 細胞系。
大小: 100μL 濃度: 1毫克/毫克可用性: 庫存 概述抗 -β-肌動蛋白兔單克隆抗體反應性小鼠，大鼠，人體測試應用 WB: 1/1000-1/10000尚未在其他應用中測試。最佳稀釋度/濃度應由最終用戶確定。產品圖片 人 β-肌動蛋白1-100殘基中的免疫原合成肽?？寺⌒詥慰寺。寺√?span>: 9E6同種型兔 IgGForm 液體防腐劑: 0.02% 氮化鈉成分: 1% BSA，PBS。PH7.4貯存指引短期(1-2星期)貯存在攝氏4度以下。分量存放于攝氏零下20度或80度。避免重復的凍結/解凍循環(huán)。所有泳道: 1:5000泳道的抗 β-肌動蛋白抗體-負載控制(AT0009)1: Jurkat (人類 T 細胞淋巴細胞樣細胞系)全細胞裂解物泳道2: A431(人類上皮癌細胞系)全細胞裂解物泳道3: HEK293(人類胚胎腎細胞系)全細胞裂解物泳道4:HepG2(人肝細胞肝癌細胞系)全細胞裂解物巷5: MCF7(人乳腺癌細胞系)全細胞裂解物巷6: NIH 3T3(小鼠胚胎成纖維細胞系)全細胞裂解物/蛋白質每泳道30μg。在1/3000稀釋條件下對兔 IgG-H 和 L- 預吸附(HRP)進行山羊次級多克隆。蛋白質印跡: β-肌動蛋白兔單克隆抗體(AT0009)使用1:1000稀釋的該抗體分析不同裂解物上的 β-肌動蛋白。1號車道: HEK293,2號車道: Hela，3號車道: PC-12,4號車道: NIH/3T3
細胞骨架由三種類型的胞質纖維組成: 微管，微絲(肌動蛋白絲)和中間絲。球形微管蛋白亞基包括微管構建塊，α/β-微管蛋白異二聚體形成所有真核細胞共有的微管蛋白亞基。需要 γ-微管蛋白使微管蛋白亞基的聚合成核，從而形成微管聚合物。許多細胞運動是由微管作用介導的，包括纖毛和鞭毛的跳動，膜囊泡的細胞質運輸，減數(shù)分裂/有絲分裂期間的染色體排列和神經細胞軸突遷移。這些運動是由于競爭性微管聚合和解聚或通過微管運動蛋白的作用。容量: 100ul容量: 1毫克/毫升可用性: 庫存概述/小鼠對 β-微管蛋白的單克隆抗體加載控制反應性人、小鼠、大鼠、兔、猴、牛、倉鼠。經測試的申請: 1/2000-1/10000。預測分子量: 55kDa。尚未在其他應用程序中測試。最佳稀釋度/濃度應由最終用戶確定。產品圖片 這種抗體檢測內源性 β 微管蛋白水平。人 β-微管蛋白氨基末端相應的免疫原合成肽。克隆/單克隆，克隆號: 6C4同種型小鼠 IgG1表型液，1mg/mL 小鼠單克隆免疫球蛋白100μg，pH7.3(+/-0.1) ，50% 甘油0.1 mg/mL 牛血清白蛋白(IgG，無蛋白酶)作為穩(wěn)定劑，0.02% 氮化鈉作為防腐劑。貯存指引短期(1-2星期)貯存在攝氏4度以下。配料及貯存在攝氏零下20度，避免冷凍/解凍循環(huán)。數(shù)據(jù)庫鏈接 SwissProt: P07437 HumanSwissProt: P99024 MouseSwissProt: P69897 RatHostMouse 應用程序 WB ImageWestern 印跡顯示人腦(小腦)組織，人腦(下丘腦)組織，小鼠腦(小腦)組織和小鼠腦(干)組織的裂解物。在大約55kDa (如所示)檢測到 β 微管蛋白的特異性條帶。本實驗是在還原條件下進行的。蛋白質印跡程序1。在0.5毫升冰冷的細胞裂解緩沖液中裂解大約107個細胞(配方如下)。該緩沖液是一種修飾的 RIPA 緩沖液，適用于回收大多數(shù)蛋白質，包括膜受體、細胞骨架相關蛋白和可溶性蛋白。這種細胞裂解緩沖制劑可作為一個單獨的產品，需要補充蛋白酶抑制劑立即使用前(貓。# FNN0011，溫度計)。其他細胞裂解緩沖液制劑，如 Laemmli 樣品緩沖液和 Triton-X 100緩沖液，也與本程序兼容。對于每個特定的應用，可能需要對細胞刺激方案和細胞裂解過程進行額外的優(yōu)化。2.將裂解物以14,000 x g 離心10分鐘，清除細胞碎片。或者，裂解物可以在100,000 x g 下超離心30分鐘以獲得更大的澄清。3.小心地將澄清的細胞裂解物倒入干凈的試管中，并用合適的方法測定蛋白質濃度，如布拉德福德試驗。建議使用聚丙烯管儲存細胞裂解物。4.用等體積的2xLaemmli 樣品緩沖液(125mM Tris，pH6.8,10% 甘油，10% sDS，0.006% 溴酚藍和130mM 二硫蘇糖醇[ dTT ])反應裂解物的等分試樣，并在100 °C 下將混合物煮沸90秒。5.將10 ~ 30μg 的細胞裂解物加入適當?shù)膯我话俜直然蛱荻任⒛z孔中，用 SDS-PAGE 電泳分離蛋白質。6.在準備西藥轉移時，切一塊比凝膠稍大的 PVDF。膜在甲醇中浸泡1分鐘，然后用 DDH2O 沖洗5分鐘。或者，可以使用硝化纖維素。7.在轉移緩沖液(配方如下)中浸泡薄膜、2片 Whatman 紙和 Western 儀器海綿2分鐘。8.將凝膠和薄膜組裝到夾層裝置中。9.將蛋白質以140mA 的溫度在室溫下轉移6 ° C 0-90分鐘。10.轉移后，用 Tris 緩沖鹽水沖洗膜2分鐘。11.用封閉緩沖液(配方如下)在4 °C 下封閉膜過夜，或在室溫下封閉膜一小時。12.在補充有1% 無 Ig BSA 和0.1% 吐溫 -20的 Tris 緩沖鹽水中以1:1000起始稀釋度將封閉的印跡與一抗在4 °C 孵育過夜或在室溫下孵育2小時。13.用添加0.1% 吐溫20的 Tris 緩沖鹽水洗滌印跡。14.使用合適的第二抗體，如山羊抗兔 IgG 結合的 HRP (Cat。# AT0097-100ul，Engibody)或山羊抗小鼠 IgG 結合 HRP (Cat。# AT0098-100ul，Engibody)與您的化學發(fā)光試劑和儀器一起使用。故障排除指南西部印跡故障排除1。沒有信號。高背景3。非特定波段4。波段大小錯誤5。黑色/灰色污點上的白色條紋6。“抹黑"1。故障排除: 無信號樣品準備•未經測試的物種？積極控制。檢查校準。?樣本中或凝膠上的抗原不足。轉移到膜上•轉移不良。?過度清洗。阻塞•太多阻塞。優(yōu)化封閉劑、濃度和時間•交叉反應封閉劑/抗體?？贵w孵化和檢測•抗體不足。?第二抗體不正確。•檢測試劑盒舊基質無效。2.故障排除: 高背景轉移到膜. 膜的選擇。阻塞•需要阻塞更長時間。•優(yōu)化封堵劑、濃度。•封閉劑與一級或二級封閉劑之間的交叉反應。?磷酸化特異性蛋白質: 使用酪蛋白阻斷?？贵w孵化和檢測•一級抗體濃度過高。?孵化溫度過高。3.故障排除: 非特異性條帶樣品制備•細胞系在其蛋白質表達譜上可以積累差異。•蛋白質有多種修飾形式，改變了流動性。目標蛋白質成片段-被蛋白酶降解或切割。•剪接變體/同種型或可能來自同一家族的蛋白質。?蛋白質的多聚體(二聚體)(還原和變性)。•樂隊可能不是特定的。運行無主控制阻塞•阻塞不足。優(yōu)化注意力，時間。抗體孵化和檢測•一級或二級抗體濃度過高。抗體尚未提純。
4.故障排除: 不正確的帶寬大小樣本準備•確保樣本減少和變性，除非在數(shù)據(jù)表中另有說明。•檢查異構體。•樣本是否為重組片段？這些將運行在不同的大小。5.故障排除: 白色條帶/黑色印跡•過多的一級抗體和/或過多的二級抗體。6.故障排除: “涂抹"•過載，蛋白質降解。
北京華新康信也有Camtag實驗試劑銷售，下面給大家講講Camtag服務以及實驗樣本；Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio Toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin Camtag實驗 Camtag試劑 Camtag說明 Camtag產品方案Camtag實驗說明 Camtag說明書 Camtag技術參數(shù) Camtag方案對比 Camtag優(yōu)勢介紹 Camtag廣州實驗試劑 Camtag深圳試劑Camtag說明書 Camtag技術參數(shù)Camtag實驗方案Camtag技術對比Camtag購買說明 Camtag天津試劑 Camtag北京試劑Camtag廈門試劑Camtag大理試劑Camtag武漢試劑Camtag福建試劑Camtag安徽試劑Camtag廣西試劑Camtag廈門試劑Camtag常州試劑Camtag安徽試劑Camtag長沙試劑Camtag哈爾濱試劑Camtag沈陽試劑Camtag深圳試劑Camtag武昌試劑Camtag湖北試劑Camtag湖南試劑Camtag上海試劑Camtag ForteBio實驗試劑，moltox實驗試劑，toxin實驗試劑，ForteBio moltox toxin 各種試劑的實驗參數(shù)，說明書，歡迎咨詢 Camtag產品介紹 Camtag產品介紹 Camtag研究方案
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